什么是定制多肽合成?
今天小編閑來沒事,就以“定制多肽合成”為主題,聊一聊自己的理解。
目前市場上做定制多肽合成服務(wù)的公司,基本都是使用Fmoc固相多肽合成技術(shù)來合成對應(yīng)序列的多肽序列,此技術(shù)是一種純化學(xué)合成的方法。生物體內(nèi)生成肽段的方向是從N端到C端,而化學(xué)合成的方向相反,是從C端往N端一個一個氨基酸的添加,最終形成完整的肽段。
至于化學(xué)合成方法怎么一個一個添加氨基酸,之前寫過很多,這里就不多介紹了,可關(guān)注微信公眾號“定制多肽合成”。
液相多肽合成方法:
常規(guī)的多肽合成,比如ACDEFGHIK,使用Fmoc固相多肽合成方法,是完全可以合成的。假如需要形成首尾酰胺鍵成環(huán),主鏈的N端氨基和C端的羧基形成酰胺鍵,這時就需要先用Fmoc固相多肽合成帶保護的肽段,然后全保護切割,在溶液中形成分子內(nèi)酰胺鍵,這種在純?nèi)芤褐行纬甚0锋I的方法,我們行業(yè)內(nèi)稱之為 液相多肽合成方法。很多復(fù)雜結(jié)構(gòu)的多肽都是需要固相和液相相結(jié)合來完成的,所以其價格會比較高。
多肽N端或C端修飾種類有哪些?
多肽合成價格是怎么計算的?
通常影響多肽價格的因素有 ,多肽的長度、多肽的純度、多肽的數(shù)量、多肽的鹽體系、多肽的修飾種類、多肽的難度評估。
多肽的長度:一般2-6個長度,價格都是一樣的,長度越長,價格肯定是越高,一般是正比例關(guān)系,比如所有需求一樣,20個氨基酸的肽段價格通常是10個氨基酸的肽段價格的兩倍。
多肽的純度:絕大多數(shù)的購買者都是選擇HPLC>95%,這個純度也是性價比最高的,HPLC>98%的話,屬于高純度了,容不得一點小雜質(zhì),價格是95%的1.2-1.4倍。
多肽的數(shù)量:這里的單位是重量單位mg、g、kg,基本都是用mg或者g,比如我需要5mg,10mg或者100mg。這里有個經(jīng)驗之談,就是很多時候,200mg的價格是100mg的1.4倍、500mg的價格是100mg的1.9倍,數(shù)量增加到了5倍,價格才2倍不到。并不是成正比例關(guān)系,所以建議適當(dāng)多買點,防止不夠用而重新購買,不僅耽誤時間還要花更多的錢。
多肽的鹽體系:多肽因為都是通過高效液相色譜方法純化的,因為流動相的原因,多肽都是攜帶酸的,比如三氟乙酸體系,醋酸體系,鹽酸體系,磷酸體系等,而一般多肽公司的報價都是默認三氟乙酸體系,很多銷售都不會說出來的,除非詢價時備注了多肽的酸體系。
醋酸體系、鹽酸體系的價格一般是默認的三氟乙酸體系價格的1.3-1.4倍,因為多肽公司要多純化一遍,置換掉三氟乙酸,成本高了,收率低了,于是乎價格就高了。
多肽的修飾種類:多肽有修飾的價格肯定比沒有修飾的價格高的,現(xiàn)在基本上N端乙?;珻端酰胺化是免費的,其它修飾都是要額外收費的,不過不用擔(dān)心,很多常規(guī)的修飾,其價格不貴的。比如5Fam修飾,需要5mg的話,修飾價格才400多。
多肽的難度評估:除非多肽有這幾點特征,特別疏水、特別長、特別易氧化、特別不穩(wěn)定、序列一直循環(huán),不然報價都不考慮這一點的。
多肽合成一般要多長時間?
常規(guī)的序列,不需要成環(huán)的話,假如一個人只合成這一條,20個氨基酸以內(nèi),6工作日就可以完成合成,純化,凍干。
多肽公司一般都是很多多肽訂單同時安排的,所以大部分訂單基本上要2-3周。