目 錄

1概述.................................1

1.1基本概念............................1

1.2    PNA的化學(xué).........................2

1.3    PNA的物理化學(xué)性質(zhì) ....................3

1.4 PNA作為分子生物學(xué)工具 ..................6

1.4. 1增強(qiáng)的PCR擴(kuò)增....................6

1.4.2    PNA的預(yù)凝膠雜交 ..................7

1.4.3    PNA輔助的稀有切割 .................8

1.4.4人工限制性酶系統(tǒng).....................8

1.4.5測定端粒的大小......................8

1.4.6核酸的純化........................9

1.5    PNA作為診斷的工具 ....................9

1.6    PNA在基因靶向藥物研究中的應(yīng)用 .............10

1.6.1反義應(yīng)用........................10

1.6.2抗基因性質(zhì) ......................10

1.6.3    PNA的細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入 .................11

1.6.4抗微生物PNA ................... 12

1.6.5    PNA在癌癥基因治療中的應(yīng)用 ............12

1.6.6    抗病毒 PNA .................. 12

1.7研制PNA的公司及其產(chǎn)品...................13 

2 PNA的化學(xué)...........................22

2.1用BOC化學(xué)合成PNA寡聚物 ................22

2. 1. 1 PNA 合成...................23 2.1.2合成方案........................28

2. 1. 3 討論.......................35 參考文獻(xiàn) 37

2-2用FMOC化學(xué)合成PNA寡聚物 ................39

2.2.1    PNA合成..........................41

2- 2. 2 小結(jié)............................50 參考文獻(xiàn)................................51

2-3 PNA/DNA 嵌合體 .......................51

2.3. 1合成策略和單體PNA構(gòu)成單元...............53

2.3.2    Mmt/乙?；Ｗo(hù)的單體構(gòu)成單元的合成循環(huán)........54

2.3.3    PNA和DNA之間連接劑的選擇 ..............58

2.3.4    實(shí)驗(yàn)方案..........................59

2.3.5    舉例............................61

2. 3. 6 討論............................66

2.4用MMT化學(xué)合成PNA-DNA嵌合體 ..............71

2. 4. 1 討論............................73

2.4.2    材料............................75

2. 4. 3 方法............................76

2.4.4 結(jié)論............................79 

2.5 PNA的標(biāo)記...........................81

2. 5.1實(shí)驗(yàn)方案..........................82

2.5.2    舉例....................................83

2. 5. 3 小結(jié)............................86 參考文獻(xiàn)..............................-“87

2.6手性PNA的合成........................89

2. 6.1手性肽核酸單體的合成 ..................89

2.6.2以N氨乙基D脯氨酸為骨架的手性肽核酸的合成 .... 90 ..

2. 6.3用Fmoc工藝合成手性PNA 或J-Ala）單體及寡聚物……91 

3 PNA的雜交性質(zhì)和分析、檢測....................100

3. 1 PNA-NA作用的熱力學(xué).....................100

3.1.1樣品制備的概況...................... 101

3.1.2吸收熔解曲線 .......................102

3.1.3等溫滴定量熱法

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