Angiotensin I/II 1-5 是由 1-5 個(gè)氨基酸組成的多肽，由血管緊張素 I/II 肽轉(zhuǎn)化而來。血管緊張素 I 是由腎素對血管緊張素原的作用形成的。血管緊張素 II 是由血管緊張素 I 產(chǎn)生的。血管緊張素 II 用于高血壓、腎素-血管緊張素系統(tǒng)和特發(fā)性膜性腎病的研究、基礎(chǔ)科學(xué)和診斷中。
Angiotensin I/II 1-5 is a peptide that contains the amino acids 1-5, which is converted from Angiotensin I/II. Angiotensin I is formed by the action of renin on angiotensinogen. Angiotensin II is produced from angiotensin I. Angiotensin II has been investigated for the treatment, basic science, and diagnostic of Hypertension, Renin Angiotensin System, and Idiopathic Membranous Nephropathy.

血管緊張素I / II（1-5）多肽序列為ASP-ARG-VAL-Tyr-Ile，是由血管緊張素I / II轉(zhuǎn)化而來的，包含氨基酸1-5。

腎素作用于血管緊張素原形成血管緊張素I，血管緊張素原是一個(gè)含12個(gè)氨基酸的α2-球蛋白。血管緊張素原主要在肝臟中產(chǎn)生，釋放到循環(huán)系統(tǒng)中。腎素作用于血管緊張素原的亮氨酸和纈氨酸之間的肽鍵，生成含有10個(gè)氨基酸的血管緊張素I，血管緊張素I在肺中血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（ACE）的作用下，除去兩個(gè)C-末端殘基轉(zhuǎn)變?yōu)檠芫o張素II（AII）。

血管緊張素是一種肽類激素，引起血管收縮及隨后血壓升高。也可以刺激醛固酮的釋放，從而促進(jìn)遠(yuǎn)端腎單位的鈉滯留，增加血壓。

多肽H2N-Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-COOH的合成步驟：

1、合成CTC樹脂：稱取2.36g CTC Resin（如初始取代度約為0.71mmol/g）和2.01mmol Fmoc-Ile-OH于反應(yīng)器中，加入適量DCM溶解氨基酸（需要注意，此時(shí)CTC樹脂體積會增大好幾倍，避免DCM溶液過少），再加入5.03mmol DIPEA（Mw：129.1,d：0.740g/ml），反應(yīng)2-3小時(shí)后，可不抽濾溶液，直接加入1ml的HPLC級甲醇，封端半小時(shí)。依次用DMF洗滌2次，甲醇洗滌1次，DCM洗滌一次，甲醇洗滌一次，DCM洗滌一次，DMF洗滌2次（這里使用甲醇和DCM交替洗滌，是為了更好地去除其他溶質(zhì)，有利于后續(xù)反應(yīng)）。得到  Fmoc-Ile-CTC Resin。結(jié)構(gòu)圖如下：

2、脫Fmoc：加3倍樹脂體積的20%Pip/DMF溶液，鼓氮?dú)?0分鐘，然后2倍樹脂體積的DMF 洗滌5次。得到 H2N-Ile-CTC Resin 。（此步驟脫除Fmoc基團(tuán)，茚三酮檢測為藍(lán)色，Pip為哌啶）。結(jié)構(gòu)圖如下：

3、縮合：取5.03mmol Fmoc-Tyr(tBu)-OH 氨基酸，加入到上述樹脂里，加適當(dāng)DMF溶解氨基酸，再依次加入10.05mmol DIPEA，4.78mmol HBTU。反應(yīng)30分鐘后，取小樣洗滌，茚三酮檢測為無色。用2倍樹脂體積的DMF 洗滌3次樹脂。（洗滌樹脂，去掉殘留溶劑，為下一步反應(yīng)做準(zhǔn)備）。得到Fmoc-Tyr(tBu)-Ile-CTC Resin。氨基酸：DIPEA：HBTU：樹脂=3：6：2.85：1（摩爾比）。結(jié)構(gòu)圖如下：

4、依次循環(huán)步驟二、步驟三，依次得到

H2N-Tyr(tBu)-Ile-CTC Resin

Fmoc-Val-Tyr(tBu)-Ile-CTC Resin

H2N-Val-Tyr(tBu)-Ile-CTC Resin

Fmoc-Arg(Pbf)-Val-Tyr(tBu)-Ile-CTC Resin

H2N-Arg(Pbf)-Val-Tyr(tBu)-Ile-CTC Resin

Fmoc-Asp(OtBu)-Arg(Pbf)-Val-Tyr(tBu)-Ile-CTC Resin

以上中間結(jié)構(gòu)，均可在專肽生物多肽計(jì)算器-多肽結(jié)構(gòu)計(jì)算器中，一鍵畫出。

最后再經(jīng)過步驟二得到 H2N-Asp(OtBu)-Arg(Pbf)-Val-Tyr(tBu)-Ile-CTC Resin，結(jié)構(gòu)如下：

5、切割：6倍樹脂體積的切割液（或每1g樹脂加8ml左右的切割液），搖床搖晃 2小時(shí)，過濾掉樹脂，用冰無水乙醚沉淀濾液，并用冰無水乙醚洗滌沉淀物3次，最后將沉淀物放真空干燥釜中，常溫干燥24小試，得到粗品H2N-Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-COOH。結(jié)構(gòu)圖見產(chǎn)品結(jié)構(gòu)圖。

切割液選擇：1）TFA：H2O=95%：5%、TFA：H2O=97.5%：2.5%

2）TFA：H2O：TIS=95%：2.5%：2.5%

3）三氟乙酸：茴香硫醚：1，2-乙二硫醇：苯酚：水=87.5%：5%：2.5%：2.5%：2.5%

（前兩種適合沒有容易氧化的氨基酸，例如Trp、Cys、Met。第三種適合幾乎所有的序列。）

6、純化凍干：使用液相色譜純化，收集目標(biāo)峰液體，進(jìn)行凍干，獲得蓬松的粉末狀固體多肽。不過這時(shí)要取小樣復(fù)測下純度 是否目標(biāo)純度。

7、最后總結(jié)：

杭州專肽生物技術(shù)有限公司（ALLPEPTIDE http://tsjxdd.com）主營定制多肽合成業(yè)務(wù)，提供各類長肽，短肽，環(huán)肽，提供各類修飾肽，如：熒光標(biāo)記修飾（CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等），功能基團(tuán)修飾肽（疊氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等），同位素標(biāo)記肽（N15、C13），訂書肽（Stapled Peptide）,脂肪酸修飾肽（Pal、Myr、Ste），磷酸化修飾肽（P-Ser、P-Thr、P-Tyr），環(huán)肽（酰胺鍵環(huán)肽、一對或者多對二硫鍵環(huán)），生物素標(biāo)記肽，PEG修飾肽，甲基化修飾肽

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