Angiotensin 1/2(1 - 9)是9個(gè)氨基酸的肽段(ASP-ARG-VAL-TYR-ILE-HIS-PRO-PHE-HIS）。

Angiotensin 1是由腎素作用在腎素血管緊張肽原上形成的，Angiotensin 1具有12個(gè)氨基酸，主要由肝臟產(chǎn)生并釋放到血液中的α-2-球蛋白。腎素剪切血管緊張肽原上亮氨酸和纈氨酸之間的肽鍵，產(chǎn)生10個(gè)氨基酸肽（Angiotensin 1）。Angiotensin 1主要通過(guò)肺內(nèi)的ACE酶刪除兩個(gè)C端的殘基轉(zhuǎn)換為Angiotensin 2(AII)。

Angiotensin是一種多肽激素，可以導(dǎo)致血管收縮以及隨后的血壓增加。Angiotensin還刺激醛固酮的釋放，促進(jìn)遠(yuǎn)端腎的鈉存留引起血壓上升。

Angiotensin 1/2 (1-9) TFA contains the amino acids 1-9 that are converted from Angiotensin I/II peptide. It is an anti-cardiac hypertrophy drug with the functions of human metabolite, rat metabolite, antihypertensive agent and cardiac protective agent.

血管緊張素1/2（1-9）TFA包含從血管緊張素I/II肽轉(zhuǎn)化的氨基酸1-9。它是一種抗心肌肥大藥物，具有人體代謝產(chǎn)物、大鼠代謝產(chǎn)物、降壓藥和心臟保護(hù)劑的作用。

多肽H2N-Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe-His-COOH的合成步驟：

1、合成CTC樹脂：稱取0.23g CTC Resin（如初始取代度約為0.46mmol/g）和0.13mmol Fmoc-His(Trt)-OH于反應(yīng)器中，加入適量DCM溶解氨基酸（需要注意，此時(shí)CTC樹脂體積會(huì)增大好幾倍，避免DCM溶液過(guò)少），再加入0.32mmol DIPEA（Mw：129.1,d：0.740g/ml），反應(yīng)2-3小時(shí)后，可不抽濾溶液，直接加入1ml的HPLC級(jí)甲醇，封端半小時(shí)。依次用DMF洗滌2次，甲醇洗滌1次，DCM洗滌一次，甲醇洗滌一次，DCM洗滌一次，DMF洗滌2次（這里使用甲醇和DCM交替洗滌，是為了更好地去除其他溶質(zhì)，有利于后續(xù)反應(yīng)）。得到  Fmoc-His(Trt)-CTC Resin。結(jié)構(gòu)圖如下：

2、脫Fmoc：加3倍樹脂體積的20%Pip/DMF溶液，鼓氮?dú)?0分鐘，然后2倍樹脂體積的DMF 洗滌5次。得到 H2N-His(Trt)-CTC Resin 。（此步驟脫除Fmoc基團(tuán)，茚三酮檢測(cè)為藍(lán)色，Pip為哌啶）。結(jié)構(gòu)圖如下：

3、縮合：取0.32mmol Fmoc-Phe-OH 氨基酸，加入到上述樹脂里，加適當(dāng)DMF溶解氨基酸，再依次加入0.63mmol DIPEA，0.3mmol HBTU。反應(yīng)30分鐘后，取小樣洗滌，茚三酮檢測(cè)為無(wú)色。用2倍樹脂體積的DMF 洗滌3次樹脂。（洗滌樹脂，去掉殘留溶劑，為下一步反應(yīng)做準(zhǔn)備）。得到Fmoc-Phe-His(Trt)-CTC Resin。氨基酸：DIPEA：HBTU：樹脂=3：6：2.85：1（摩爾比）。結(jié)構(gòu)圖如下：

4、依次循環(huán)步驟二、步驟三，依次得到

H2N-Phe-His(Trt)-CTC Resin

Fmoc-Pro-Phe-His(Trt)-CTC Resin

H2N-Pro-Phe-His(Trt)-CTC Resin

Fmoc-His(Trt)-Pro-Phe-His(Trt)-CTC Resin

H2N-His(Trt)-Pro-Phe-His(Trt)-CTC Resin

Fmoc-Ile-His(Trt)-Pro-Phe-His(Trt)-CTC Resin

H2N-Ile-His(Trt)-Pro-Phe-His(Trt)-CTC Resin

Fmoc-Tyr(tBu)-Ile-His(Trt)-Pro-Phe-His(Trt)-CTC Resin

H2N-Tyr(tBu)-Ile-His(Trt)-Pro-Phe-His(Trt)-CTC Resin

Fmoc-Val-Tyr(tBu)-Ile-His(Trt)-Pro-Phe-His(Trt)-CTC Resin

H2N-Val-Tyr(tBu)-Ile-His(Trt)-Pro-Phe-His(Trt)-CTC Resin

Fmoc-Arg(Pbf)-Val-Tyr(tBu)-Ile-His(Trt)-Pro-Phe-His(Trt)-CTC Resin

H2N-Arg(Pbf)-Val-Tyr(tBu)-Ile-His(Trt)-Pro-Phe-His(Trt)-CTC Resin

Fmoc-Asp(OtBu)-Arg(Pbf)-Val-Tyr(tBu)-Ile-His(Trt)-Pro-Phe-His(Trt)-CTC Resin

以上中間結(jié)構(gòu)，均可在專肽生物多肽計(jì)算器-多肽結(jié)構(gòu)計(jì)算器中，一鍵畫出。

最后再經(jīng)過(guò)步驟二得到 H2N-Asp(OtBu)-Arg(Pbf)-Val-Tyr(tBu)-Ile-His(Trt)-Pro-Phe-His(Trt)-CTC Resin，結(jié)構(gòu)如下：

5、切割：6倍樹脂體積的切割液（或每1g樹脂加8ml左右的切割液），搖床搖晃 2小時(shí)，過(guò)濾掉樹脂，用冰無(wú)水乙醚沉淀濾液，并用冰無(wú)水乙醚洗滌沉淀物3次，最后將沉淀物放真空干燥釜中，常溫干燥24小試，得到粗品H2N-Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe-His-COOH。結(jié)構(gòu)圖見產(chǎn)品結(jié)構(gòu)圖。

切割液選擇：1）TFA：H2O=95%：5%、TFA：H2O=97.5%：2.5%

2）TFA：H2O：TIS=95%：2.5%：2.5%

3）三氟乙酸：茴香硫醚：1，2-乙二硫醇：苯酚：水=87.5%：5%：2.5%：2.5%：2.5%

（前兩種適合沒(méi)有容易氧化的氨基酸，例如Trp、Cys、Met。第三種適合幾乎所有的序列。）

6、純化凍干：使用液相色譜純化，收集目標(biāo)峰液體，進(jìn)行凍干，獲得蓬松的粉末狀固體多肽。不過(guò)這時(shí)要取小樣復(fù)測(cè)下純度 是否目標(biāo)純度。

7、最后總結(jié)：

杭州專肽生物技術(shù)有限公司（ALLPEPTIDE http://tsjxdd.com）主營(yíng)定制多肽合成業(yè)務(wù)，提供各類長(zhǎng)肽，短肽，環(huán)肽，提供各類修飾肽，如：熒光標(biāo)記修飾（CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等），功能基團(tuán)修飾肽（疊氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等），同位素標(biāo)記肽（N15、C13），訂書肽（Stapled Peptide）,脂肪酸修飾肽（Pal、Myr、Ste），磷酸化修飾肽（P-Ser、P-Thr、P-Tyr），環(huán)肽（酰胺鍵環(huán)肽、一對(duì)或者多對(duì)二硫鍵環(huán)），生物素標(biāo)記肽，PEG修飾肽，甲基化修飾肽

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