白細胞介素II（60-70），化學式為C68H104N14O14S，氨基酸序列NH2 LEU-THR-PHE-LYS-PHE-TYR-MET-PRO-LYS-LYS-ALA-COOH，分子量為1373.7。白細胞介素-2（IL-2）是免疫系統(tǒng)的細胞因子信號分子，調節(jié)白細胞（淋巴細胞）的活性，對免疫應答具有重要作用。IL-2是免疫系統(tǒng)的可溶性激素樣調節(jié)劑，是鑒定和表征的第一個白介素分子。IL-2對T細胞的生長、增殖和分化成“效應子”T細胞是必須的。IL-2是在免疫應答過程中由T細胞產生的，對于T細胞免疫記憶的發(fā)育具有重要作用，T細胞免疫記憶依賴于抗原選擇性T細胞的數目和功能。成熟的T細胞又稱為調節(jié)性T細胞，在胸腺T細胞的發(fā)展中，IL-2對T細胞的成熟是必須的。

1. Cantrell DA, Smith KA (June 1984). "The interleukin-2 T-cell system: a new cell growth model". Science 224 (4655): 1312–6.

2. Smith KA (May 1988). "Interleukin-2: inception, impact, and implications". Science 240 (4856): 1169–76.

3. Sakaguchi S, Sakaguchi N, Asano M, Itoh M, Toda M (August 1995). "Immunologic self-tolerance maintained by activated T cells expressing IL-2 receptor alpha-chains (CD25). Breakdown of a single mechanism of self-tolerance causes various autoimmune diseases". J. Immunol. 155 (3): 1151–64.

4. ThorntonAM, Shevach EM (July 1998). "CD4+CD25+ immunoregulatory T cells suppress polyclonal T cell activation in vitro by inhibiting interleukin 2 production". J. Exp. Med. 188 (2): 287–96.

多肽H2N-Leu-Thr-Phe-Lys-Phe-Tyr-Met-Pro-Lys-Lys-Ala-COOH的合成步驟：

1、合成CTC樹脂：稱取0.68g CTC Resin（如初始取代度約為0.57mmol/g）和0.47mmol Fmoc-Ala-OH于反應器中，加入適量DCM溶解氨基酸（需要注意，此時CTC樹脂體積會增大好幾倍，避免DCM溶液過少），再加入1.16mmol DIPEA（Mw：129.1,d：0.740g/ml），反應2-3小時后，可不抽濾溶液，直接加入1ml的HPLC級甲醇，封端半小時。依次用DMF洗滌2次，甲醇洗滌1次，DCM洗滌一次，甲醇洗滌一次，DCM洗滌一次，DMF洗滌2次（這里使用甲醇和DCM交替洗滌，是為了更好地去除其他溶質，有利于后續(xù)反應）。得到  Fmoc-Ala-CTC Resin。結構圖如下：

2、脫Fmoc：加3倍樹脂體積的20%Pip/DMF溶液，鼓氮氣30分鐘，然后2倍樹脂體積的DMF 洗滌5次。得到 H2N-Ala-CTC Resin 。（此步驟脫除Fmoc基團，茚三酮檢測為藍色，Pip為哌啶）。結構圖如下：

3、縮合：取1.16mmol Fmoc-Lys(Boc)-OH 氨基酸，加入到上述樹脂里，加適當DMF溶解氨基酸，再依次加入2.33mmol DIPEA，1.1mmol HBTU。反應30分鐘后，取小樣洗滌，茚三酮檢測為無色。用2倍樹脂體積的DMF 洗滌3次樹脂。（洗滌樹脂，去掉殘留溶劑，為下一步反應做準備）。得到Fmoc-Lys(Boc)-Ala-CTC Resin。氨基酸：DIPEA：HBTU：樹脂=3：6：2.85：1（摩爾比）。結構圖如下：

4、依次循環(huán)步驟二、步驟三，依次得到

H2N-Lys(Boc)-Ala-CTC Resin

Fmoc-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Ala-CTC Resin

H2N-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Ala-CTC Resin

Fmoc-Pro-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Ala-CTC Resin

H2N-Pro-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Ala-CTC Resin

Fmoc-Met-Pro-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Ala-CTC Resin

H2N-Met-Pro-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Ala-CTC Resin

Fmoc-Tyr(tBu)-Met-Pro-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Ala-CTC Resin

H2N-Tyr(tBu)-Met-Pro-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Ala-CTC Resin

Fmoc-Phe-Tyr(tBu)-Met-Pro-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Ala-CTC Resin

H2N-Phe-Tyr(tBu)-Met-Pro-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Ala-CTC Resin

Fmoc-Lys(Boc)-Phe-Tyr(tBu)-Met-Pro-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Ala-CTC Resin

H2N-Lys(Boc)-Phe-Tyr(tBu)-Met-Pro-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Ala-CTC Resin

Fmoc-Phe-Lys(Boc)-Phe-Tyr(tBu)-Met-Pro-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Ala-CTC Resin

H2N-Phe-Lys(Boc)-Phe-Tyr(tBu)-Met-Pro-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Ala-CTC Resin

Fmoc-Thr(tBu)-Phe-Lys(Boc)-Phe-Tyr(tBu)-Met-Pro-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Ala-CTC Resin

H2N-Thr(tBu)-Phe-Lys(Boc)-Phe-Tyr(tBu)-Met-Pro-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Ala-CTC Resin

Fmoc-Leu-Thr(tBu)-Phe-Lys(Boc)-Phe-Tyr(tBu)-Met-Pro-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Ala-CTC Resin

以上中間結構，均可在專肽生物多肽計算器-多肽結構計算器中，一鍵畫出。

最后再經過步驟二得到 H2N-Leu-Thr(tBu)-Phe-Lys(Boc)-Phe-Tyr(tBu)-Met-Pro-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Ala-CTC Resin，結構如下：

5、切割：6倍樹脂體積的切割液（或每1g樹脂加8ml左右的切割液），搖床搖晃 2小時，過濾掉樹脂，用冰無水乙醚沉淀濾液，并用冰無水乙醚洗滌沉淀物3次，最后將沉淀物放真空干燥釜中，常溫干燥24小試，得到粗品H2N-Leu-Thr-Phe-Lys-Phe-Tyr-Met-Pro-Lys-Lys-Ala-COOH。結構圖見產品結構圖。

切割液選擇：1）TFA：H2O=95%：5%

2）TFA：H2O：TIS=95%：2.5%：2.5%

3）三氟乙酸：茴香硫醚：1，2-乙二硫醇：苯酚：水=87.5%：5%：2.5%：2.5%：2.5%

（前兩種適合沒有容易氧化的氨基酸，例如Trp、Cys、Met。第三種適合幾乎所有的序列。）

6、純化凍干：使用液相色譜純化，收集目標峰液體，進行凍干，獲得蓬松的粉末狀固體多肽。不過這時要取小樣復測下純度 是否目標純度。

7、最后總結：

杭州專肽生物技術有限公司（ALLPEPTIDE http://tsjxdd.com）主營定制多肽合成業(yè)務，提供各類長肽，短肽，環(huán)肽，提供各類修飾肽，如：熒光標記修飾（CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等），功能基團修飾肽（疊氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等），同位素標記肽（N15、C13），訂書肽（Stapled Peptide）,脂肪酸修飾肽（Pal、Myr、Ste），磷酸化修飾肽（P-Ser、P-Thr、P-Tyr），環(huán)肽（酰胺鍵環(huán)肽、一對或者多對二硫鍵環(huán)），生物素標記肽，PEG修飾肽，甲基化修飾肽等。

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