Nature Protocols 封面刊發(fā)華理學(xué)者納米孔道分析新方法
??????? 2017年8月24日，Nature Protocols以封面文章的形式，發(fā)表了華東理工大學(xué)化學(xué)與分子工程學(xué)院龍億濤科研團(tuán)隊(duì)在納米孔道的研究成果-“Construction of an aerolysin nanopore in a lipid bilayer for single oligonucleotide analysis”。該文章報(bào)道了以Aerolysin氣單胞菌溶素構(gòu)建成的電化學(xué)限域納米孔道，建立了單分子水平分析技術(shù)平臺(tái)，可對(duì)單個(gè)寡聚核苷酸分子進(jìn)行高靈敏、高分辨檢測(cè)，應(yīng)用于核酸外切酶逐步剪切單鏈DNA動(dòng)力學(xué)行為的實(shí)時(shí)觀測(cè)，實(shí)現(xiàn)單酶分子動(dòng)態(tài)催化過程研究。
??????? 納米孔道單分子分析的是將單個(gè)分子利用電化學(xué)技術(shù)限域在納米尺寸的孔道空間內(nèi)，精準(zhǔn)測(cè)量待測(cè)分子與納米孔道間的弱相互作用所產(chǎn)生的特征性電流信號(hào)譜圖，從而獲取單個(gè)待測(cè)分子的動(dòng)態(tài)行為信息。在Nature Protocols發(fā)表的文章中詳細(xì)介紹了Aerolysin生物納米孔道單分子檢測(cè)平臺(tái)的構(gòu)建步驟，即Aerolysin經(jīng)胰蛋白酶活化后在水溶液中自組裝形成七聚體，自發(fā)嵌入磷脂雙分子層，從而形成直徑約為1 nm的跨膜蛋白限域孔道。利用基于Aerolysin構(gòu)建的納米孔道單分子檢測(cè)平臺(tái)，無需任何基因突變、化學(xué)修飾實(shí)現(xiàn)了寡聚核苷酸分子等生物分子的超靈敏分析，可應(yīng)用于DNA損傷檢測(cè)、microRNA分析的精準(zhǔn)分析，以期在多肽分子動(dòng)態(tài)構(gòu)象分析，蛋白質(zhì)測(cè)序研究等領(lǐng)域?qū)崿F(xiàn)突破。
??????? 論文中使用的儀器裝置和實(shí)驗(yàn)步驟是該團(tuán)隊(duì)多年來的技術(shù)發(fā)展和實(shí)踐總結(jié)，曹嬋博士和廖冬芳同學(xué)是論文的共同第一作者，研究工作得到田禾院士大力支持和細(xì)心指導(dǎo)，獲得國(guó)家自然科學(xué)基金委創(chuàng)新研究群體、重大科研儀器研制專項(xiàng)，高等學(xué)校學(xué)科創(chuàng)新引智計(jì)劃、上海市優(yōu)秀學(xué)科帶頭人計(jì)劃和中央高?；究蒲袑ｍ?xiàng)資金的資助。
論文鏈接：http://www.nature.com/nprot/journal/v12/n9/full/nprot.2017.077.html
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