王永明/王紅艷團(tuán)隊(duì)開(kāi)發(fā)出新的小型CRISPR/Cas9工具
SpCas9是最常用的基因編輯工具，具有活性高、編輯范圍大的優(yōu)點(diǎn)（識(shí)別NGG PAM）【1】。但是SpCas9比較大，不能被包裝到AAV病毒中用于基因治療【2】。隨后科研人員開(kāi)發(fā)出了幾個(gè)小型CRISPR/Cas9工具，能夠被包裝到AAV病毒中。其中SaCas9活性較高，但是編輯范圍?。ㄗR(shí)別NNGRRT PAM）【3】。其它幾個(gè)小型CRISPR/Cas9活性偏低。
2020年3月31日，復(fù)旦大學(xué)王永明課題組聯(lián)合復(fù)旦大學(xué)王紅艷課題組在PLOS Biology上在線發(fā)表了題為“A compact Cas9 ortholog from staphylococcus auricularis (SauriCas9) expands the DNA targeting scope”的研究論文。研究者開(kāi)發(fā)出了一個(gè)新的小型CRISPR/Cas9工具，具有活性高（和SaCas9相當(dāng)）、編輯范圍大的優(yōu)點(diǎn)。該Cas9來(lái)源于耳氏葡萄球菌（Staphylococcus auricularis），被命名為SauriCas9，識(shí)別NNGG PAM序列，編輯范圍與常用的SpCas9一樣。
圖1. SauriCas9的PAM及其活性比分析
SauriCas9通過(guò)AAV病毒包裝后，在多種細(xì)胞類型中實(shí)現(xiàn)了基因編輯（圖2），說(shuō)明SauriCas9具有用于基因治療的潛力。
圖2. 利用AAV病毒遞送后SauriCas9的編輯效率
此外，研究者還把SauriCas9與脫氨酶融合，制作了兩種新的堿基編輯器，本別是SauriBE4max和SauriABEmax，可以實(shí)現(xiàn)C-T或者A-G兩種堿基轉(zhuǎn)換（圖3）。
圖3. SauriCas9用于堿基編輯
胡子英博士是論文第一作者，王永明研究員是論文的通訊作者。
原文鏈接：https://journals.plos.org/plosbiology/article?id=10.1371/journal.pbio.3000686
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