??????? 該技術(shù)的設(shè)計包括兩個部分:a)一套帶有翻譯后修飾的賴氨酸遺傳編碼系統(tǒng),可以在特定位點插入帶修飾的賴氨酸。此外,在賴氨酸的主鏈上還帶有光交聯(lián)基團,可在UV光下與修飾相關(guān)的蛋白發(fā)生共價交聯(lián),可以用于研究該修飾特定的效應(yīng)蛋白。b)一套帶有保護基團的賴氨酸遺傳編碼系統(tǒng),保護基團可以在大腸桿菌自身的還原性環(huán)境中發(fā)生脫除,將帶有光交聯(lián)基團的賴氨酸定點插入到組蛋白當中,用于證實交聯(lián)到的效應(yīng)蛋白的特異性。該團隊以巴豆?;揎棡榇恚l(fā)展了該技術(shù)對應(yīng)的賴氨酸巴豆?;揎椀墓饨宦?lián)探針(K*cr)和帶有保護基團的光交聯(lián)探針(PNBK*)兩個探針,將這兩種探針分別引入到組蛋白H3的56位和79位,并通過光交聯(lián)基團捕捉到了H3上79位巴豆酰化的去巴豆?;?/span>Sirt3。
??????? 北京大學陳鵬教授和香港大學李祥教授為本文的共同通訊作者;化學與分子工程學院14級博士生謝肖、香港大學13級博士生李小萌、生命科學聯(lián)合中心15級博士生秦芳菲,為該文的共同第一作者。此項研究得到了國家自然科學基金委、科技部、北大-清華生命科學聯(lián)合中心、香港協(xié)作研究金(CRF),香港優(yōu)配研究金(GRF),杰出青年學者計劃(ECS)的資助。
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