近日,華南理工大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院朱偉教授聯(lián)合華南師范大學(xué)胡家銘教授和北京航空航天常凌乾教授在國際著名期刊Journal of the American Chemical Society(IF=15.419)雜志上在線發(fā)表題目為“Living Cell Nanoporation and Exosomal RNA Analysis Platform for Real-Time Assessment of Cellular Therapies”的研究論文。
論文鏈接:https://pubs.acs.org/doi/10.1021/jacs.2c02268
圖1.細胞轉(zhuǎn)染和外泌體RNA分析一體化納米芯片構(gòu)建及其細胞治療實時評估示意圖
離體細胞治療主要包括細胞轉(zhuǎn)染和效力測試。細胞轉(zhuǎn)染的常用技術(shù)依賴于病毒載體,其過程具有高度隨機性,通常會導(dǎo)致炎癥反應(yīng)或細胞死亡。此外,目前基于qRT-PCR、NGS、流式細胞術(shù)和基因微陣列芯片對轉(zhuǎn)染細胞的效力測試涉及多個步驟,包括細胞培養(yǎng)、核酸提取、核酸擴增、熒光標記和數(shù)據(jù)分析等,需要幾天時間完成整個過程。為了克服傳統(tǒng)方法的這些缺陷,迫切需要開發(fā)能夠準確地將治療藥物輸送到單個活細胞并即時分析核酸表達以評估細胞治療的平臺。
在本工作中,團隊將納米通道電穿孔技術(shù)和基于外泌體的原位 RNA 表達分析技術(shù)相結(jié)合,構(gòu)建了可同時進行活細胞納米轉(zhuǎn)染和外泌體RNA分析的一體化納米芯片平臺(圖1),稱為“細胞納米孔和外泌體評估裝置(CEAD)”。在 CEAD 中,納米通道和微陣列可將單個細胞定位于多孔納米通道中,從而將功能性藥物快速準確地輸送到細胞中。隨后,束縛有納米顆粒的生物芯片可以捕獲細胞分泌的外泌體,同時實現(xiàn)對RNA的原位檢測。該裝置可以在單細胞水平上實現(xiàn)精確的劑量遞送和細胞治療的實時評估。CEAD裝置在快速細胞轉(zhuǎn)染和重編程、藥物篩選和治療質(zhì)量控制等領(lǐng)域具有重大的應(yīng)用前景。
該研究得到了國家自然科學(xué)基金、珠江人才計劃創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)團隊項目和珠江人才計劃青年拔尖人才項目等的資助。
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