近日,《酶學(xué)方法》(Methods in Enzymology)叢書在線發(fā)表了安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院劉琳實驗室撰寫的論文,題為“Production and structural characterization of the cytochrome P450 enzymes in carotene ring hydroxylation”。該文是第671卷中的一章,描述了對細胞色素P450第97家族(CYP97)進行重組制備、活性檢測與結(jié)構(gòu)解析的實驗操作方法。
《酶學(xué)方法》叢書是生物化學(xué)領(lǐng)域最常用的參考書之一,創(chuàng)立于1955年,已發(fā)表664卷。將于今年7月正式出版的《酶學(xué)方法》第671卷匯集了近年來在類胡蘿卜素研究領(lǐng)域的進展。在我院撰寫的這一章里,作者以CYP97B1為例,詳細總結(jié)了對CYP97及其還原系統(tǒng)進行表達、純化、表征的經(jīng)驗,回顧了對CYP97A3和CYP97C1進行結(jié)晶及結(jié)構(gòu)解析的步驟。CYP97的主要功能是催化α-胡蘿卜素紫羅蘭酮環(huán)上的羥化反應(yīng)。植物CYP97包括A、B、C三個亞家族,模式植物擬南芥基因組編碼了CYP97A3、CYP97B1、CYP97C1。我院和首都師范大學(xué)、中科院植物研究所合作完成了CYP97A3和CYP97C1的結(jié)構(gòu)解析(圖1),研究結(jié)果已在2020年發(fā)表于PNAS雜志。
生命科學(xué)學(xué)院青年教師汪佳為該章的第一作者,劉琳教授為通訊作者。研究得到了科技部和國家自然科學(xué)基金的資助。
圖1、CYP97A3和CYP97C1的結(jié)構(gòu)及其催化的反應(yīng)。CYP97A3和CYP97C1的結(jié)構(gòu)用飄帶模型表示,螺旋為藍色、折疊股為黃色、卷曲為青色;血紅素、視黃醛、去垢劑分別為品紅、橙、黑色;淡綠色背景表示膜界面。
論文鏈接:
1. Wang J, Niu G, Guo Q, Liu L.* Production and structural characterization of the cytochrome P450 enzymes in carotene ring hydroxylation. Methods in Enzymology. 2022. Online
2. Niu G, Guo Q, Wang J, Zhao S, He Y.*, Liu L.* Structural basis for plant lutein biosynthesis from α-carotene. PNAS. 2020. 117 (25) 14150-14157.
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