我院陳翊平教授課題組在抗生素殘留檢測方面取得新進展
1. 研究背景
抗生素殘留超標一直是制約我國乳品行業(yè)發(fā)展的主要問題之一。其中氯霉素作為一種高效的抑菌性廣譜抗生素,被用于養(yǎng)殖業(yè)中以預防奶牛的感染。然而,氯霉素在牛奶中的殘留卻存在極大的潛在危害。人體攝入氯霉素對骨髓造血機能有抑制作用,可引起粒細胞缺乏病、再生障礙性貧血和溶血性貧血,嚴重者可產(chǎn)生致死效應。而且,人體對氯霉素較動物更敏感,嬰幼兒的代謝和排泄機能尚不完善,對氯霉素最敏感,可出現(xiàn)致命的“灰嬰綜合征”。因此,食品安全國家標準中明確規(guī)定乳品中不得檢出氯霉素。這就需要有滿足現(xiàn)實需求檢測方法的開發(fā)?;诖诵枨?,陳翊平教授課題組構(gòu)建了基于納米顆粒表面增強橢圓偏振成像生物傳感器(Surface-enhanced imaging ellipsometry biosensor, SEIE-biosensor),實現(xiàn)了對牛奶中氯霉素殘留超靈敏、便捷快速的檢測,并且從理論上探討了納米顆粒使橢偏信號增強的機理。
2. 相關研究工作
(1)研究方法
橢圓偏振技術(shù)在測量膜厚度方面具有極高的分辨率(約1 nm),鑒于這一特性,該技術(shù)可用于無標記生物傳感。然而,在痕量目標物的檢測中該技術(shù)仍存在橢偏信號弱、靈敏度不夠等問題。因此對橢偏信號進行信號放大是解決問題的關鍵所在??紤]到納米顆粒在生物傳感器中作為信號放大和信號讀出媒介的顯著優(yōu)勢,而且從理論上橢偏信號的強弱與厚度、介電常數(shù)和表面覆蓋率這三個因素直接相關。因此將納米顆粒用于橢偏信號的放大具有兩個明顯的優(yōu)點:一是納米顆粒的大小和質(zhì)量遠大于蛋白質(zhì)(抗體或抗原),可以大幅度提高橢圓偏振光的厚度分辨率,有助于放大橢圓偏振信號;二是納米顆粒具有獨特的光學特性,可以直接改變橢圓偏振光或通過協(xié)同效應增強橢圓偏振信號,這也可能有助于增強橢圓偏振信號?;诖嗽恚覀儗⒓{米顆粒(磁納米顆粒和金納米顆粒)用于增強橢偏信號,并從實驗和理論的角度進行了驗證,證明納米顆粒對橢偏信號的放大具有明顯效果,將其應用于牛奶中氯霉素殘留的檢測時達到了超靈敏、快速檢測的目的。
圖1 納米顆粒用于SEIE-biosensor信號放大的原理圖
(2)實驗結(jié)果
本工作對包覆于硅板上的30 nm磁顆粒進行了SEM和AFM表征(圖2),表明30 nm磁顆粒能夠通過抗原-抗體相互作用吸附在硅板表面,并且磁顆粒能夠有效的增強橢偏信號。在方法的分析性能方面,比較了SEIE-biosensor和IE-biosensor檢測氯霉素的靈敏度(圖3),結(jié)果表明納米顆粒介導的表面增強橢偏成像傳感器性能明顯優(yōu)于傳統(tǒng)的方法,最低檢出限可達6 pg/mL。最后,通過方法比較和真實樣本檢測(圖4),表明本方法具有良好的準確性。
圖2 磁納米顆粒包覆于硅板上的SEM圖譜(左)/AFM圖譜(右)
圖3 SEIE-biosensor和IE-biosensor檢測氯霉素的靈敏度比較
圖4 SEIE、HPLC-MS和IE用于檢測牛奶樣品中的氯霉素
(3)論文相關信息
相關工作發(fā)表于Analytical Chemistry雜志上(Anal. Chem. 2019, 91, 6769-6774),論文第一作者為華中農(nóng)大食品科技學院王知龍博士,通訊作者為陳翊平教授(E-mail: chenyiping@mail.hzau.edu.cn.),本研究獲“國家自然科學基金”(81671784)資助。
論文鏈接:https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.analchem.9b00846
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